Diagnostic prénatal des maladies génétiques : une équipe de chercheurs met au point une méthode non invasive, fiable et plus précoce

C'est sur une simple prise de sang que repose le test développé par  l’équipe de Patrizia Paterlini-Bréchot. Ce test, basé sur la méthode "ISET", permet  de façon fiable et sans risque de fausse couche, d'établir un diagnostic prénatal de maladies génétiques comme l’amyotrophie spinale,  la mucoviscidose et même la trisomie 21, à  partir  de  la  5ème   semaine d’aménorrhée,  c’est-à-dire, avant toute autre méthode de diagnostic prénatal.

Jusqu'à présent seules  des méthodes dites invasives telles que l’amniocentèse et la biopsie de villosités choriales (BVC) étaient considérées comme fiables. Elles n'en demeurent pas moins risquées. En effet, en en France elles sont pratiquées chaque année sur 80 000 grossesses à risque et entrainent  800 fausses couches de fœtus sains. C'est pour éviter ce risque, compris entre 0,5% et 2%, que depuis des années de nombreux efforts de recherche sont entrepris pour mettre au point de nouvelles méthodes.

La présence de cellules fœtales dans le sang maternel est connue depuis 1969, date à laquelle on a pu démontrer la présence de chromosomes Y dans certaines cellules circulantes chez les femmes portant un fœtus de sexe masculin. Cette découverte ouvrait des perspectives majeures en offrant  l'opportunité aux chercheurs d'analyser l'ADN contenu dans ces cellules pour procéder au diagnostic prénatal de maladies génétiques.

La principale difficulté de cette entreprise résidait non seulement dans l'extrême rareté des cellules fœtales dans le sang maternel (une cellule fœtale pour environ 10 millions de cellules maternelles) mais aussi dans la nécessité de les isoler rigoureusement des cellules maternelles pour ne pas mélanger les matériels génétiques et fausser les analyses.

C'est en partant du constat simple que les cellules sanguines étaient les plus petites de l'organisme, que l'équipe du Professeur Paterlini-Bréchot est dans un premier temps parvenu à isoler les cellules tumorales puis  les cellules fœtales de type trophoblastique.

Après plus de 10 années de recherche acharnée, la méthode ISET (Isolation by Size of Epithelial Tumor/Trophoblastic Cells) était dévoilée en 2003 dans la revue  The Lancet

Cette méthode se déroule selon les étapes suivantes :
• isolation des cellules trophoblastiques à partir du sang
• extraction des cellules suspectes d’être fœtales, une par une, à l’aide du microscope équipé de laser Nikon
• analyse comparative du génome des cellules micro-disséquées après amplification par PCR  :  Cette procédure permet de rechercher la présence d'un allèle paternel et d'un allèle maternel dans l’ADN de la cellule isolée, ce qui permet d'affirmer avec certitude son origine foetale.
•recherche de mutation (diagnostic génétique) ciblée sur les cellules avec génome fœtal.

Même si les premiers diagnostics d’Amyotrophie Spinale furent ainsi établis, il restait à prouver cliniquement la fiabilité de cette méthode. C'est pourquoi cette méthode a été testée sur  63 femmes enceintes suivies à l’Hôpital Necker et présentant un risque élevé de mettre au monde un enfant atteint d'amyotrophie spinale ou de mucoviscidose.
Pour chacune d’entre elles, un test de diagnostic ISET a été effectué, suivi d’un prélèvement pour BVC. Une fois les examens accomplis, les résultats obtenus par les deux méthodes, invasive et non-invasive, ont été comparés : sur les 63 femmes, la méthode ISET a donné le même résultat que la BVC.

Ainsi ces résultats, valident-ils cliniquement  la méthode ISET qui devrait permettre  dès l'an prochain d'éviter un nombre trop important de fausses couches évitables.

Pour Patrizia Paterlini Bréchot : « Ces résultats de première importance ouvrent le débat sur la possibilité d’offrir un diagnostic prénatal non invasif à l’ensemble des femmes enceintes »


Pour en savoir plus :
-G. VONA, C. BÉROUD, A. BENACHI, A. QUENETTE, J.P. BONNEFONT, Y. DUMEZ, B. LACOUR, P. PATERLINI-BRÉCHOT. Enrichment and genetic analyses of fetal cells circulating in the maternal blood by the ISET technique and single cell microdissection : a non-invasive tool for early prenatal diagnosis. Am J Pathol, 160  : 51-58, 2002.
-C. BÉROUD, M. KARLIOVA, J. P. BONNEFONT, A. BENACHI, A. MUNNICH, Y. DUMEZ, B. LACOUR, P. PATERLINI-BRÉCHOT. Prenatal diagnosis of Spinal Muscular Atrophy (SMA) by genetic analysis of circulating fetal cells. The Lancet, 361 :1013-4, 2003.
-A. SAKER, A. BENACHI, J.P. BONNEFONT, A. MUNNICH, Y. DUMEZ, B. LACOUR, P. PATERLINI-BRÉCHOT.Genetic characterization of circulating fetal cells allows non invasive prenatal diagnosis of cystic fibrosis. Prenat Diagn, 26 : 906-16, 2006.
-H. MOUAWIA, A.SAKER, JP. JAIS, A. BENACHI, L. BUSSIÈRES, B. LACOUR, JP. BONNEFONT, R. FRYDMAN, JL. SIMPSON, P. PATERLINI-BRECHOT. Circulating trophoblastic cells provide genetic diagnosis in 63 fetuses at risk for cystic fibrosis or spinal muscular atrophy, Reproductive BioMedicine Online, 25: 508-520, 2012.
- http://ciane.net/Ciane/EPU191007
- http://ciane.net/Ciane/IsetHistorique
- http://fr.wikipedia.org/wiki/Réaction_en_chaîne_par_polymérase